歌舞伎町一角的万事屋里，坂田银时（小栗旬饰）、志村新八（菅田将晖饰）和神乐（桥本环奈饰）因无力支付房租而陷入困境，只好一起外出打工。他们先到夜总会当女招待，随后又临时改行做理发师，却偏偏接连遇上微服出访的将军德川茂茂（胜地凉饰），始终提心吊胆地应付这位身份尊贵的大人物。
与此同时，真选组的土方十四郎（柳乐优弥饰）遭到伊东鸭太郎（三浦春马饰）暗算，性格从原本刚强坚毅的武士变得柔弱胆怯，甚至成了沉迷宅文化的御宅族，最终被真选组驱逐。之后，伊东与鬼兵队联手，开始策划一场足以颠覆江户政府的巨大阴谋。
本片改编自空知英秋创作的超人气漫画，是该系列真人电影的第二部，故事取材于“将军接待篇”和“真选组动乱篇”。
