《八十龟酱观察日记第二季》讲述了从东京转学到爱知县的阵界斗的校园生活。作为土生土长的东京人，界斗原本期待在新学校结识会说当地方言、拥有独特生活习俗的同学，但现实中的大家并没有表现出太过明显的差异。直到他遇见后辈八十龟最中，并加入学校的写真部，才逐渐接触到爱知地区的名古屋文化与方言。
八十龟最中是土生土长的名古屋人，对东京出身的阵界斗抱有一种难以言明的对抗意识。两人在轻松有趣的日常相处中，一边展开各种互动，一边向观众介绍名古屋的风土人情。此前，为了推动当地观光，名古屋还任命八十龟最中担任名古屋观光大使。
