《我的二哥二嫂》将故事置于20世纪70年代末，随着那场祸国殃民的十年动乱终于结束，曾被耽误青春的年轻人迎来了恢复高考的消息。此时，已经当上生产队长的周文（于洋饰）和弟弟周武（于震饰）早已适应了乡村生活。性格乐观、直率的周武在父母撮合下，与同样爽朗的李英姿（郝蕾饰）订下婚约。
不久，中专录取通知书送到了乡下，正当周家沉浸在喜悦之中时，周家老爹却因一场车祸突然离世。面对残酷的现实，家里只能供两个兄弟中的一个继续求学。关键时刻，周文说出了周武并非自己亲弟弟的事实。最终，周武获得了上学的机会，而两兄弟之间也逐渐产生隔阂，关系渐行渐远。
历经波折后，周武终于决定与李英姿结婚。婚后的两人彼此扶持，共同熬过了艰难岁月。然而，他们与大哥周文之间积累的恩怨并没有因此结束。
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